Food Focus Thailand
AUGUST 2013
41
Q PLUS FOODS CO., LTD.
199 Moo 8, Buapaktha, Banglen, Nakornpathom 73130
Tel. +66 34 993 117, +66 34 993 118 Fax. +66 34 993 119
e-mail:
FF#89_ad Q Plus_Pro3.indd 1
7/12/13 2:36:26 PM
การเพาะเลี้
ยงเชื้
อ
Campylobacter
spp.
จาก
ตั
วอย
างอาหาร
ชั่
งตั
วอย
างอาหาร 25 กรั
ม ใส
ในถุ
งตี
ตั
วอย
าง
(Stomacher bag) โดยบรรจุ
อาหารเลี้
ยงเชื้
อชนิ
ดเหลว
Bolton broth ที่
นึ่
งฆ
าเชื้
อแล
ว (Sterile) 100 มิ
ลลิ
ลิ
ตร
ลงในขวด โดยใส
ทั้
ง Bolton ที่
ผสมยาปฎิ
ชี
วนะ
(Antibiotic) สำหรั
บการตรวจเพาะเชื้
อ
Campylobacter
sp. จากนั้
นนำไปหมุ
นเหวี่
ยงที่
ความเร็
วรอบ 25 rpm
เป
นเวลา 5 นาที
หลั
งจากนั้
นใส
ตั
วอย
างอาหาร
ลงไปในขวดเพาะเชื้
อ นำไปบ
มที่
ตู
บ
มในสภาวะที่
มี
ก
าซออกซิ
เจนน
อย อุ
ณหภู
มิ
37°C เป
นเวลา 5 ชั่
วโมง
และบ
มต
อที่
อุ
ณหภู
มิ
42°C เป
นเวลา 24-48 ชั่
วโมง
หลั
งจากนั้
นนำอาหารเลี้
ยงเชื้
อมา Streak ลงบน Abeyta-
Hunt-Bark Agar หรื
อ Modified
Campylobacter
Blood-Free Selective Agar (mCCDA) ซึ่
งเป
นอาหาร-
เลี้
ยงเชื้
อที่
ทราบองค
ประกอบทางเคมี
แน
ชั
ด (Selective
media) สำหรั
บเลี้
ยงเชื้
อ
Campylobacter
sp. จากนั้
น
นำไปบ
มในภาชนะเลี้
ยงเชื้
อในสภาวะไร
ออกซิ
เจนที่
ใส
Gas pack ที่
อุ
ณหภู
มิ
42°C เป
นเวลา 24-48 ชั่
วโมง และ
37°C เป
นเวลา 48-72 ชั่
วโมง ในกรณี
ที่
จะตรวจเชื้
อ
Campylobacter
fetus
2. The Blood Agar Base Culture
After the first step, culture
Campylobacter
spp. on blood agar base with 5% leaked
horse blood under the micro anaerobic atmosphere. The experimenter can inoculate
directly onto the surface of blood agar base with 5% leaked horse blood and streak for
isolation with inoculating loop. Then, incubate in an anaerobic jar with gas pack under
42°C for 48 hours. After that, observe and record the appearance of the colony of
Campylobacter
spp. of which the side is around 1.5 mm, grey color, and glossy. (Figure
1) The microorganism can be confirmed by gram stain under the microscopy. The special
feature of
Campylobacter
spp. is gram negative bacteria which has the bacilli, curve or
spiral shape. (Figure 2)