Food Focus Thailand
APRIL 2013
32
1) การใช
เอนไซม
ในการกำจั
ดสตาร
ชและโปรตี
น
2) การรวบรวมใยอาหารที่
ละลายน้
ำได
โดยการตกตะกอนด
วยเอทานอล
3) การแยกและชั่
งน้
ำหนั
กใยอาหารส
วนที่
เหลื
อ
4) การวิ
เคราะห
หาโปรตี
นและเถ
าในใยอาหาร เพื่
อคำนวณหาปริ
มาณ
ใยอาหารที่
แท
จริ
ง
การวิ
เคราะห
ใยอาหารที่
ละลายน้
ำทำได
2 แบบ คื
อ การวิ
เคราะห
โดยตรง และวิ
เคราะห
โดยการหั
กลบปริ
มาณใยอาหารที่
ไม
ละลายน้
ำ
ออกจากใยอาหารทั้
งหมด
หน
วยงาน Association of Official Analytical Chemists (AOAC) ได
พั
ฒนาวิ
ธี
มาตรฐานในการวิ
เคราะห
ใยอาหารมาอย
างยาวนาน เพื่
อให
ได
วิ
ธี
การวิ
เคราะห
ที่
ง
าย ทำซ้
ำได
และสามารถวิ
เคราะห
ปริ
มาณใยอาหาร
ได
ถู
กต
องและสอดคล
องกั
บคำจำกั
ดความของใยอาหาร ตั
วอย
างวิ
ธี
มาตรฐานดั
งกล
าว ได
แก
1. AOAC 985.29 (Prosky, 1988) เป
นวิ
ธี
การใช
เอนไซม
ร
วมกั
บ
การวิ
เคราะห
โดยน้
ำหนั
ก เพื่
อวิ
เคราะห
หาใยอาหารทั้
งหมดในอาหาร
2. AOAC 991.42 (Prosky, 1992) เป
นวิ
ธี
การใช
เอนไซม
ร
วมกั
บ
การวิ
เคราะห
โดยน้
ำหนั
ก โดยใช
ฟอสเฟต บั
ฟเฟอร
เพื่
อวิ
เคราะห
หา
ใยอาหารที่
ไม
ละลายน้
ำในอาหารและผลิ
ตภั
ณฑ
อาหาร
3. AOAC 993.19 (Prosky, 1994) เป
นวิ
ธี
การใช
เอนไซม
ร
วมกั
บ
การวิ
เคราะห
โดยน้
ำหนั
กโดยใช
ฟอสเฟต บั
ฟเฟอร
เพื่
อวิ
เคราะห
หา
ใยอาหารที่
ละลายน้
ำในอาหารและผลิ
ตภั
ณฑ
อาหาร
4. AOAC 991.43 (Lee, 1992) เป
นวิ
ธี
การใช
เอนไซม
ร
วมกั
บ
การวิ
เคราะห
โดยน้
ำหนั
กโดยใช
MES-TRIS บั
ฟเฟอร
และใช
อั
ลฟา-
อะไมเลสจากตั
บอ
อนของหมู
เพื่
อวิ
เคราะห
หาใยอาหารทั้
งหมด รวมทั้
ง
ใยอาหารที่
ละลายน้
ำและไม
ละลายน้
ำในอาหาร
5. AOAC 992.16 (Mongeau and Brassard, 1993) เป
นวิ
ธี
การใช
เอนไซม
ร
วมกั
บการวิ
เคราะห
โดยน้
ำหนั
ก โดยเพิ่
มขั้
นตอนการใช
หม
อนึ่
ง-
อั
ดไอ (Autoclave) เพื่
อวิ
เคราะห
หาใยอาหารทั้
งหมดในธั
ญพื
ช ถั่
ว ผั
ก
และผลไม
6. AOAC 993.21 (Li and Cardozo, 1994) เป
นวิ
ธี
การใช
เอนไซม
ร
วมกั
บ
การวิ
เคราะห
โดยน้
ำหนั
ก เพื่
อวิ
เคราะห
หาใยอาหารทั้
งหมดในอาหาร
และผลิ
ตภั
ณฑ
อาหารที่
มี
สตาร
ชน
อยกว
าหรื
อเท
ากั
บร
อยละ 2
7. AOAC 994.13 (Uppsala method) เป
นวิ
ธี
การใช
เอนไซม
ร
วมกั
บ
การวิ
เคราะห
อื่
นๆ เพื่
อวิ
เคราะห
หาใยอาหารทั้
งหมด โดยวิ
เคราะห
องค
-
ประกอบน้
ำตาลของนิ
วทรอลพอลิ
แซ็
กคาไรด
(Neutral polysaccharide)
ด
วยแก
สโครมาโทกราฟ
วิ
เคราะห
Klason lignin ด
วยการวิ
เคราะห
โดย
น้
ำหนั
ก และวิ
เคราะห
กรดยู
โรนิ
ค (Uronic acid) ด
วยการเปรี
ยบเที
ยบ
ความเข
มของสี
(Colorimetric method)
8. AOAC 995.16 (McCleary and Codd, 1991) เป
นวิ
ธี
การใช
เอนไซม
เบต
า-กลู
คาเนส และเบต
า-กลู
โคซิ
เดส เพื่
อวิ
เคราะห
เบต
า-กลู
แคน
ในข
าวโอ
ตและบาร
เลย
9. AOAC 2002.02 (McCleary and Monaghan, 2002) เป
นวิ
ธี
การใช
เอนไซม
เพื่
อวิ
เคราะห
รี
ซิ
สแทนต
สตาร
ช (Resistant starch)
วิ
ธี
การวิ
เคราะห
ใยอาหารส
วนใหญ
ที่
กล
าวมาข
างต
นอาศั
ยหลั
กการ-
The Analysis of Dietary Fiber
Presently, analysis of dietary fiber in human foods by enzymatic-
gravimetric and enzymatic-chemical methods is preferred over the
crude and neutral detergent fiber methods. Only insoluble fiber, such
as cellulose, lignin and most hemicelluloses that is not soluble in
warm water, are recovered by the crude and neutral detergent fiber
methods. These methods underestimate the value of total dietary fiber
for foods containing soluble dietary fiber and are therefore not suited
to determine the amount of dietary fiber in human foods.
The main steps of the enzymatic-gravimetric method involve
1) enzymatic hydrolysis for starch and protein removal
2) the collection of soluble fiber by precipitation with aqueous
ethanol
3) separating and weighting the residue of fiber
4) corrections for protein and ash in fiber residue to obtain the
precise data.
Two ways of deriving soluble fiber are by direct analysis and by
the subtraction of insoluble fiber from total fiber.
The Association of Official Analytical Chemists (AOAC) has
adopted many methodologies for measuring dietary fiber over the
years to obtain analytical methods which are easy, reproducible
and accurate to use for quantitative measurement of all dietary
fiber following their definition. These are the examples of those
methods.
1. AOAC 985.29 (Prosky, 1988): enzymatic-gravimetric method
to measure total dietary fiber in foods
2. AOAC 991.42 (Prosky, 1992): enzymatic-gravimetric method
using phosphate buffer to measure insoluble dietary fiber in foods
and food products
3. AOAC 993.19 (Prosky, 1994): enzymatic-gravimetric method
using phosphate buffer to measure soluble dietary fiber in foods and
food products
4.AOAC 991.43 (Lee, 1992): enzymatic-gravimetric method using
MES-TRIS buffer and
-amylase from porcine pancreas to measure
total, soluble and insoluble dietary fiber in foods
5. AOAC 992.16 (Mongeau and Brassard, 1993): enzymatic-
gravimetric method with initiate step of autoclaving to measure total
dietary fiber in cereal, beans, vegetables and fruits
6. AOAC 993.21 (Li and Cardozo, 1994): enzymatic-gravimetric
method to measure total dietary fiber in foods and food products
with ≤ 2% starch
7. AOAC 994.13 (Uppsala method): combination of enzymatic
and others method to measure total dietary fiber. Other methods
are determination of neutral sugar residues by gas chromatography,
Klason lignin by gravimetric method and uronic acid by colorimetric
method.
8. AOAC 995.16 (McCleary and Codd, 1991): enzymatic method
using
β
-glucanase and
β
-glucosidase to measure
β
-glucan in oat
and barley
9. AOAC 2002.02 (McCleary and Monaghan, 2002): enzymatic
method to measure resistant starch
Most analytical methods as mentioned above include the
precipitation of soluble fiber by adding ethanol. However, the non-
digestible oligosaccharides with a degree of polymerization less than
10 are not included in the precipitate even though their characteristics
and benefits are similar to dietary fiber. They are not precipitated due